ECL Plus超敏发光液（Enhanced Chemiluminescence Plus）是一种广泛应用于生物分子检测的试剂，尤其在Western blotting（蛋白质印迹法）、免疫沉淀、免疫组化以及其他免疫检测技术中具有重要作用。ECL Plus试剂通过化学发光的方式，提供极为敏感的检测信号，用于检测标记的抗体或目标分子。由于其高灵敏度，ECL Plus常用于低丰度分子（如微量蛋白质或抗原）的检测。

1. ECL Plus超敏发光液的原理

ECL Plus超敏发光液基于化学发光原理。其主要成分包括：

• 过氧化氢（H2O2）：作为氧化剂，参与化学反应。

• 发光底物（如Luminol）：在过氧化氢的作用下发生氧化反应，生成激发态的发光分子。

• 发光信号的检测：这些激发态分子会释放光子（即发光），这些光子被化学发光检测系统（如X光片、CCD相机等）捕获并转化为信号。

在Western blotting等实验中，目标蛋白通过与特异性抗体结合，并与带有酶（如辣根过氧化物酶，HRP）标记的二级抗体结合。ECL Plus液中的底物会在HRP酶的催化下，生成光信号，从而实现对目标蛋白的检测。

2. ECL Plus超敏发光液的组成

ECL Plus超敏发光液通常由以下几种主要成分组成：

• 底物溶液：如Luminol或其他发光底物，负责在过氧化氢的作用下发生氧化反应，产生激发态的分子。

• 过氧化氢溶液：作为氧化剂，促进底物的氧化反应，并最终产生光信号。

• 稳定剂：确保ECL Plus发光液的长期稳定性，避免底物溶液和过氧化氢发生提前反应或降解。

• 缓冲液：确保缓冲系统的pH值稳定，使发光反应顺利进行。