产品简介:
本产品为配制SDS-PAGE浓缩胶缓冲液,可用于配制各种浓度的变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。
操作步骤(仅供参考):
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度。
I 灌 制 分 离 胶
1、 参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2、 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯容器中混合。
3、 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1cm的水层, 使凝胶表面保持平整。
5、 静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶
1、 去除覆盖在分离胶上的水层。
2、 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、 加入10%过硫酸铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、 静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、 待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、 进行常规电泳操作。