产品简介:
10% SDS-PAGE下层胶预混液(10% SDS-PAGE Resolving Gel Master Mix)提供了简单而又超快速地配制10% SDS-PAGE凝胶(即SDS聚丙烯酰胺凝胶)下层胶所需的主要试剂,包括Tric-HCl(pH8.8)、Acr-Bis(29:1)、SDS等。
SDS-PAGE下层胶预混液系列产品有6%、8%、10%、12%和15%共5种常见浓度供您选择,如您需要配制其他浓度凝胶,可以考虑购买SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒、SDS-PAGE凝胶配制试剂盒,或单独购买Acr-Bis(29:1)、10%SDS和Tris-HCl (pH8.8)等进行各种不同浓度SDS-PAGE凝胶的配制。
本下层胶预混液已经把10%的SDS-PAGE凝胶配制所需的Tris-HCl(pH8.8)、Acr-Bis(29:1)、SDS等预混合好,使用前仅需加入适量凝胶聚合催化剂(过硫酸铵或其替代物,如Ammonium persulfate substitute)和TEMED即可简单快速地完成下层胶(分离胶)的配制。
下层胶配制完成后,可以直接配合使用SDS-PAGE上层胶预混液,轻松超快速完成10% SDS-PAGE凝胶的配制。也可以直接选购10% SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒。
本产品的250ml包装约可配制30-50块常规大小的10% SDS-PAGE凝胶的下层胶,500ml包装约可配制60-100块常规大小的10% SDS-PAGE凝胶的下层胶。具体可以配制的凝胶数量和凝胶的厚薄以及凝胶的大小有关。
操作步骤:
1、 根据目的蛋白的分子量大小选择合适浓度的SDS-PAGE下层胶(即分离胶)。
2、 称取适量过硫酸铵或其替代物,用双蒸水或其它高纯度的水配制10%溶液。过硫酸铵或其替代物配成溶液后容易失效,需注意存放及时间限制
3、 在10% SDS-PAGE下层胶预混液中,按照1%的比例加入相应量的10%过硫酸铵或其替代物溶液,按照0.04%的比例加入相应量的TEMED。例如10ml 10% SDS-PAGE下层胶预混液中,加入100μl 10%过硫酸铵或其替代物溶液和4μl TEMED。适当混匀后倒入到制胶模具中,用异丙醇、0.1%SDS或蒸馏水封住液面,直至下层胶凝固充分。通常10-30分钟内胶会凝固。注:具体的凝固时间和温度及光照有关,说明书中10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的正常推荐用量是室温为25℃时的推荐用量。为达到与25℃时相近的凝固时间,当室温低于25℃时,可以适当同时加大10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的用量,例如20℃时建议用量是正常推荐用量的1.5倍,15℃时建议用量是正常推荐用量的2倍。
4、 在下层胶凝固后,将其上面用于封胶的液体倒掉并吸干后,即可进行SDS-PAGE上层胶的配制。可以自行配制上层胶也可选用碧云天的SDS-PAGE上层胶预混液进行配制。
5、 配制好的凝胶如果当天不能使用,可以在4℃保存1-2天后使用。
注意事项:
1、 进行下层胶配制时,需要另外准备过硫酸铵或其替代物以及TEMED。
2、 本产品含有Acr-Bis,对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
3、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。