DEAE-葡聚糖溶液(10mg/ml)

产品简介：

将DNA导入细胞的方法很多，采用DEAE-葡聚糖转染法主要优点是相对简单、快速、同次试验内和不同次实验间的重复性较好，该法尤其适用于瞬时转染。DEAE-葡聚糖溶液(10mg/ml)采用特殊溶剂溶解，经过滤除菌，临用前37℃保温并充分混匀。

操作步骤（仅供参考）：

1、 取对数生长期的细胞，制备成细胞悬液。将细胞密度调整到5×10⁵个/ml接种至6孔板，培养12~24h。

2、 用蒸馏水或TE将质粒DNA稀释至0.1~1μg/μl，将DNA溶液直接加到转染培养液至其终溶度为1.0μg/ml。

3、 将DEAE-葡聚糖溶液(10mg/ml)预热至37℃并颠倒混匀，加到DNA/转染培养液使DEAE-葡聚糖溶液100mg/ml，最适浓度需要自行摸索。

4、 50~70%汇片的细胞培养物中的培养液轻轻吸出，换上适合体积的37℃的补充有DEAE-葡聚糖/DNA/转染培养液，37℃孵育4h。

5、 倒置显微镜下观察细胞，细胞内会出现颗粒，有的细胞核出现固缩，有的细胞边缘出现部分破碎。有效的DEAE-葡聚糖转染常伴有25~75%的细胞死亡。

6、 换用100mmol/L氯喹培养液继续培养，进行下游实验。

注意事项：

1、 某些特点细胞需要较长的转染时间，因为氯喹有细胞毒性，可在转染的 时期加入。

2、 转染时，摇动细胞可保障转染效率均一，最适转染时间需通过实验确定。

3、 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

4、 本产品 于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或 ，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。