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- 品牌:abiowell
- 货号:HG-VSW0920
- 发布日期: 2022-11-03
- 更新日期: 2025-04-30
品牌 | abiowell |
货号 | HG-VSW0920 |
用途 | |
是否危险化学品 | |
包装规格 | |
别名 | |
CAS编号 | |
产地/厂商 | |
是否进口 |
产品名称 |
M13KO7辅助噬菌体 / M13K07辅助噬菌体 |
产品用途 |
噬菌体表面展示系统辅助噬菌体 |
产品特性 |
产生用于测序和突变的单链噬菌粒DNA |
产品简介 |
M13KO7是gII基因具有Met40IIe突变的M13 噬菌体。M13KO7具有P15A的复制起点和Tn903卡那霉素抗性基因,这两个片段插入至M13的复制起点。M13KO7在没有噬菌粒DNA的条件下也能复制。当存在一个携带有野生型的M13或f1复制起点的噬菌粒时,单链噬菌粒可以完整包装,并分泌到培养基中。该特性可用于生产用作突变和测序的单链噬菌粒DNA。为了繁殖和扩增M13KO7辅助噬菌体,需要使用TG1、ER2738或菌株XL1 Blue MRF′大肠杆菌菌株,因为这些菌株含有supE44突变,该突变提供谷氨酰胺抑制剂tRNA。M13K07辅助噬菌体严格用于从已切除的噬菌体中产生单链DNA(这也是VCSM13辅助噬菌体的用途)。 |
来源 |
M13KO7噬菌体上清是用标准程序从受侵染的E. coli ER2738中分离获得。 |
浓度 |
1.0 x 1011 pfu/ml |
规格 |
500ul/管,1管 |
贮存条件 |
1 x PBS和50%甘油 |
贮存温度 |
-20℃ |
扩增 |
1. Streak out TG1 onto an 2YT plate. 2. Pick a single colony of TG1 and inoculate into 5ml 2×YT and grow until OD600 = 0.3 (~2.5×108 cells/ml). 3. Add helper phage at a multiplicity of infection (MOI) of 20:1 (phage-to-cells ratio). Note: If amplifying M13K07 helper phage, add Kanamycin to a final concentration of 25μg/ml to the medium 30 minutes after the helper phage and cells have been allowed to grow together. 4. Grow the culture at 37℃ with vigorous aeration (~300rpm) for 8 hours. 5. Heat the culture to 65℃ for 15 minutes. 6. Spin down the cell debris and transfer the supernatant to a fresh tube. 7. Titer the helper phage produced. |