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产品展厅
M13KO7辅助噬菌体
  • 品牌:abiowell
  • 货号:HG-VSW0920
  • 发布日期: 2022-11-03
  • 更新日期: 2025-04-30
产品详请
品牌 abiowell
货号 HG-VSW0920
用途
是否危险化学品
包装规格
别名
CAS编号
产地/厂商
是否进口

产品名称

M13KO7辅助噬菌体 / M13K07辅助噬菌体

产品用途

噬菌体表面展示系统辅助噬菌体

产品特性

产生用于测序和突变的单链噬菌粒DNA

产品简介

M13KO7gII基因具有Met40IIe突变的M13 噬菌体。M13KO7具有P15A的复制起点和Tn903卡那霉素抗性基因,这两个片段插入至M13的复制起点。M13KO7在没有噬菌粒DNA的条件下也能复制。当存在一个携带有野生型的M13f1复制起点的噬菌粒时,单链噬菌粒可以完整包装,并分泌到培养基中。该特性可用于生产用作突变和测序的单链噬菌粒DNA。为了繁殖和扩增M13KO7辅助噬菌体,需要使用TG1ER2738或菌株XL1 Blue MRF′大肠杆菌菌株,因为这些菌株含有supE44突变,该突变提供谷氨酰胺抑制剂tRNAM13K07辅助噬菌体严格用于从已切除的噬菌体中产生单链DNA(这也是VCSM13辅助噬菌体的用途)。

来源

M13KO7噬菌体上清是用标准程序从受侵染的E. coli ER2738中分离获得。

浓度

1.0 x 1011 pfu/ml

规格

500ul/管,1

贮存条件

1 x PBS50%甘油

贮存温度

-20

扩增

1. Streak out TG1 onto an 2YT plate.

2. Pick a single colony of TG1 and inoculate into 5ml 2×YT and grow until OD600 = 0.3 (~2.5×108 cells/ml).

3. Add helper phage at a multiplicity of infection (MOI) of 20:1 (phage-to-cells ratio).

Note: If amplifying M13K07 helper phage, add Kanamycin to a final concentration of 25μg/ml to the medium 30 minutes after the helper phage and cells have been allowed to grow together.

4. Grow the culture at 37 with vigorous aeration (~300rpm) for 8 hours.

5. Heat the culture to 65 for 15 minutes.

6. Spin down the cell debris and transfer the supernatant to a fresh tube.

7. Titer the helper phage produced.

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