Atg7抗体是一种用于识别自噬相关蛋白7（Autophagy Related 7, Atg7，又称Apg7）的特异性抗体。Atg7是细胞自噬通路中的关键酶类蛋白，其编码产物在多种生物过程中具有基础性的调控作用。Atg7抗体被广泛应用于研究其表达、定位及与其他自噬蛋白的相互作用等基础研究中。

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一、Atg7蛋白简介

Atg7是一种E1样酶（E1-like enzyme），在自噬过程中起到激活并连接Atg12和Atg8（LC3/GABARAP家族）蛋白的作用。它为两种不同的泛素样修饰系统提供启动酶活性，是自噬小泡形成与扩展的重要调节因子。Atg7在多种组织中表达，尤其在代谢活跃的组织中更为丰富。

Atg7蛋白的特性包括：

• 属于泛素激活酶家族；

• 分子量约为78–80 kDa（具体大小依物种而异）；

• 存在多个保守结构域，参与蛋白间连接反应；

• 不同物种的Atg7序列具有较高保守性。

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二、抗体来源与制备方法

Atg7抗体的制备一般采用以下流程：

• 抗原设计：选用Atg7的特异性肽段或重组蛋白片段；

• 动物免疫：常用兔、小鼠或山羊等；

• 抗体制备：

  • 多克隆抗体：从免疫动物血清中纯化；

  • 单克隆抗体：通过杂交瘤细胞技术筛选；

  • 重组抗体：通过体外表达和工程化制备。

有些Atg7抗体经过亲和纯化处理，以提高其特异性和背景信噪比。

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三、抗体类型及结构特点

常见的Atg7抗体类型包括：

• 兔多克隆抗体：识别多个表位，适合初步筛查；

• 鼠单克隆抗体：识别单一表位，适用于高特异性实验；

• 重组单克隆抗体：一致性好，适合重复性高的科研需求；

• 标签抗体（如HRP、Alexa Fluor 标记）：用于免疫检测和成像。

每种抗体根据实验目的和样本类型有不同的适用场景。

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四、常用实验应用

Atg7抗体广泛应用于基础生物学研究中的以下实验类型：

• Western Blot（WB）：检测Atg7蛋白表达水平及分子量；

• 免疫组化（IHC）：观察Atg7在组织切片中的定位；

• 免疫荧光（IF）：在细胞内追踪Atg7的分布；

• 免疫沉淀（IP）：分析Atg7与其他蛋白的相互作用；

• 流式细胞术（Flow Cytometry）：用于检测胞内Atg7表达（需细胞裂解或穿膜处理）。

使用前需根据实验物种（人、小鼠、大鼠等）选择对应的抗体克隆和反应条件。

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五、保存条件与使用建议

Atg7抗体的保存与使用通常遵循以下标准：

• 保存温度：

  • 短期：4°C，避免光照；

  • 长期：-20°C或以下，避免多次冻融；

• 常见缓冲液：PBS、含甘油的缓冲体系，部分含叠氮化钠或BSA；

• 稀释建议：根据厂商说明书和实验类型调整使用浓度（例如：WB推荐1:1000；IHC推荐1:200等）。

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